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收到HL-1細胞後怎麽處理比較正確
點擊次數:76 發布時間:2020-10-22
  HL-1細胞接受後處理
  1)收到細胞後,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給红杏视频免费。
  2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜並將T25瓶置於37℃培養約2-3h。
  3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的完全培養基。
  4)如果細胞密度達80%-90%請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
  5)接到細胞次日,請檢查細胞是否汙染,若發現汙染或疑似汙染,請及時與红杏视频tv取得聯係。
  HL-1細胞培養操作
  1)複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液並檢查細胞密度。
  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
  1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
  2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)於培養瓶中,置於37℃培養箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化。
  3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養液後吹勻。
  4.將細胞懸液按1:2比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
  3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
  
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