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培養A20細胞不是一件簡單的事情,有很多細節是需要注意的
點擊次數:280 發布時間:2020-06-19
  A20細胞的培養操作
  1)複蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養基後吹勻。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液並檢查細胞密度。
  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
  1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
  2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)於培養瓶中,置於37℃培養箱中消化1-2分鍾,然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓並脫落,迅速拿回操作台,輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化。
  3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻後吸出,在1000RPM條件下離心4分鍾,棄去上清液,補加1-2mL培養液後吹勻。
  4.將細胞懸液按1:2比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
  A20細胞培養注意事項
  1.收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和红杏视频免费APP聯係。
  2.仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致。若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。
  3.用75%酒精擦拭細胞瓶表麵,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置於培養箱內靜置培養4~6小時,再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用台盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心後用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和红杏视频免费聯係,信息確認後红杏视频免费為您再免費寄送一次。
  4.靜置細胞貼壁後,請將細胞瓶內的培養基倒出,留6~8mL維持細胞正常培養,待細胞匯合度80%左右時正常傳代。
  5.請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養。培養瓶內多餘的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件。
  6.建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便於和技術部溝通交流。由於運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和红杏视频免费APP聯係,告知細胞的具體情況,以便红杏视频tv的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
  7.該細胞僅供科研使用。
  以上便是今天關於培養A20細胞不是一件簡單的事情,有很多細節是需要注意的的全部分享了,希望對大家今後使用本設備能有幫助。
 
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