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SW13細胞培養要滿足的無菌環境,要滿足哪些技術要求
點擊次數:116 發布時間:2020-09-25
  下麵是SW13細胞株培養的具體無菌技術要點:
  1.實驗開始前,無菌室和無菌操作台需要紫外光照射30到60分鍾完全滅菌,用70%ethanol擦拭無菌操作台麵,並且打開無菌操作台風扇運行10分鍾之後,才可以進行實驗操作。每次操作隻能處理一株細胞株,即使培養基完全相同也不可共用培養基,以避免細胞間汙染或失誤混淆。實驗完成後,請將實驗物品拿出工作台,用70%ethanol再次擦拭無菌操作台麵。操作間隔應該讓無菌操作台運轉10分鍾到15分鍾後,才能進行下一個細胞株的操作。
  2.無菌操作工作的區域應保持清潔和寬敞,必要物品(試管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暫時放置,其它實驗用品使用完畢後應移出,有利於空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭後方可帶入無菌操作台內。實驗操作過程應在台麵的中央無菌區域內完成,請勿在邊緣非無菌區域進行操作。
  3.小心取用無菌實驗物品,避免細菌汙染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處,也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開後,請用手夾住瓶蓋並輕握瓶身,傾斜大約45°角取用,盡量不要將瓶蓋口朝上放置於桌麵。
  4.工作人員應當首先注意自身安全,必須穿戴齊實驗衣和實驗手套後才能進行實驗。對於病毒感染或是來自人類的細胞株應當特別小心操作,並選擇適當等級的無菌操作台進行(至少是ClassII)。操作過程中,應避免引起aerosol的產生,小心有毒性藥品,例如DMSO和TPA等,並避免針頭的傷害等等。
  SW13細胞冷凍保存:常使用的冷凍培養基是含5-10%DMSO和90-95%原細胞生長用的新鮮培養基均勻混合之。
  注意:由於DMSO稀釋時會放出大量熱能,所以不能將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配製完成。
  細胞傳代密度:依照細胞株基本數據傳代密度或稀釋分盤的比例傳代即可。細胞數太少或稀釋的太多也是造成細胞無法生長的重要原因。
  SW13細胞使用注意事項
  1、使用產品時應注意無菌操作,避免汙染。
  2、本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
  3、為保持本產品的使用效果,不宜將其長時間放置於室溫或較高的溫度環境中。
  4、所有產品請於保質期內使用,超出保質期,必須放棄使用。
  5、本產品隻供進一步科研使用,不可應用於臨床等其他方麵。
  
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