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STC-1細胞的操作均需在無菌操作台中嚴格無菌條件下進行
點擊次數:170 發布時間:2020-07-27
       STC-1細胞來源於雙重轉基因小鼠的腸腫瘤組織。含有連接大鼠胰島素基因啟動子與多瘤病毒小T抗原的融合基因與含有連接大鼠胰島素基因與SV40的基因結合產生雙轉基因小鼠。這些小鼠一般患有腸腫瘤以及胰腺β細胞瘤。
  STC-1細胞的培養方法:
  開啟凍存管
  1.準備一個培養瓶,加入適宜細胞培養的培養基,液體體積按照說明書的推薦配置,並平衡培養基的溫度和pH(CO2)。
  2.在37℃水浴中或細胞的正常生長溫度下將凍存管輕輕搖動。解凍要快,約2分鍾或直到冰晶融化即可。
  3.從水浴中取出凍存管並用浸泡或噴灑70%乙醇的方式來消毒。進一步的操作均需在無菌操作台中嚴格無菌條件下進行。
  4.擰開凍存管的管帽並將內容物轉移到一個含有9ml推薦培養基的無菌離心管中。通過溫和離心(125×g10min)除去冷凍保護劑(DMSO)。棄去上清,並用1或2ml完全培養基重懸細胞。將這些細胞懸液轉移到含有完全培養基的培養瓶中並輕輕搖動以徹底混勻。
  5.培養24小時後檢查細胞狀態並在需要時進行傳代。
  STC-1細胞出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什麽?
  (1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;
  (2)凍存的細胞複蘇後,絕大多數細胞未存活,重發;
  (3)存活的細胞靜置24小時後,絕大多數細胞未存活,重發;
  (4)凍存的細胞複蘇後或存活的細胞靜置4小時後並且未開封,出現汙染,重發;
  (5)視具體情況而定。
  細胞出現問題,不予以重發的情況有哪些?
  (1)客戶造成細胞汙染,不重發;
  (2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
  (3)細胞狀態不好,未提供細胞培養前3天照片的,不重發;
  (4)細胞培養時經其它處理的,不重發;
  (5)細胞收到2天內,未告知,不重發;
  (6)視具體情況而定。
  
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