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細胞培養請看這裏
點擊次數:684 發布時間:2019-02-20

選對培養基很重要:細胞都沒有固定的培養條件,隻有更加適合。比如在MEM中培養的細胞,很可能在DMEM或M199中也很容易生長。總之,MEM是貼壁細胞好的選擇,而 RPMI-1640是懸浮細胞培養一個好的開始,當然,這是在對細胞培養條件不明確的時候的明智之舉,當培養條件有標注的時候,需要按照標注的來進行,因為好的細胞會給實驗帶來意想不到的效果.

L-穀氨酰胺和GlutaMAX-I

L-穀氨酰胺在脫掉氨基後可作為培養細胞的能量來源、多參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-穀氨酰胺在溶液中經過一段時間後會降解,而 L-穀氨酰胺的降解會導致氨的形成,氨對細胞有毒性,故敏感細胞不建議使用。 一般培養細胞建議使用GlutaMAX-I,因為GlutaMAX-I 二肽溶液有小的降解,如果在相同條件下,L-穀氨酰胺幾乎完全降解。

 

酚紅:酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養基。由於酚紅幹擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養基。 

台盼蘭怎麽計數活細胞?

      用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的台盼蘭溶液。輕輕混勻,數分鍾後,用血球計數板計數細胞。活細胞排斥台盼蘭,不會有任何變化,而染成藍色的細胞就是死細胞。 

 

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